木瓜凝乳蛋白酶的单甲氧基聚乙二醇化学修饰及其对酶活力和抗原*的影响

目的研究木瓜凝乳蛋白酶(Cp)的单甲氧基聚乙二醇(mPEG)化学修饰对酶活力和抗原*的影响,为该酶的修饰改*提供实验依据.方法在底物保护和无底物保护下,分别以单甲氧基聚乙二醇的两种活化产物mPEG1和mPEG2对木瓜凝乳蛋白酶进行共价修饰,以三*基苯磺*法测定各修饰酶的平均氨基修饰度;以大分子酪蛋白和小分子BAEE为底物分别测定各修饰酶的酶活*;以ELISA法检测各修饰酶的抗原*.结果①mpEG1和mPEG2修饰均能降低及消除酶的抗原*,其中mPEG2的效果更为明显.②二者的化学修饰均使酶活力有所下降,其中mPEG1修饰酶的酶活力(分别以酪蛋白和BAEE为作用底物,下同)均高于mPEG2修饰酶的酶活力(尤其是当底物为大分子蛋白质时).③底物保护下的修饰酶酶活力均显著高于无底物保护的酶活力.结论以mPEG1为修饰剂,在底物保护下的Cp修饰能在消除抗原*的同时,获得仍具较高酶活力的修饰酶.

房师松,FangShi-song(深圳市疾病预防控制中心)

崔堂兵,郭勇,CuiTang-bing,GuoYong(华南理工大学生物科学与工程学院) 

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