人胰高血糖素样肽-1串联体的克隆及其表达

为大量获取人胰高血糖素样肽-1,利用基因串联的方法构建了人胰高血糖素样肽-1的一组串联体.将化学合成的人胰高血糖素样肽-1(humanglucagon-likepeptide-1,hGLP-1)cDNA基因*质粒载体pET-32a(+)中,构建成硫氧还蛋白(thioredoxin)及六聚组氨*(hexahistidine)与rhGLP-1的融合表达载体pET32-GLLP-1.在此基础上将该融合基因序列进行同向串联,获得二串和三串的表达载体pET32-GLP-1-2和pET32-GLP-1-3.将该三种表达载体转化大肠杆菌BLR(DE3)后获得相应的基因工程菌.结果表明:三种基因工程菌经发酵和IPTG诱导后均正确表达目的蛋白,目的蛋白表达量随着基因串数的增加而得到一定提高,重组蛋白经分离纯化后进行生物学活*测试具有明显的降低血糖浓度作用.

• 人α-防御素基因克隆及其毕赤酵母表达的研究

  为探讨人α-防御素(HNP2)酵母表达,根据HNP2氨基*序列和巴斯德毕赤酵母密码偏爱*,设计HNP2基因序列片段,构建pGAPZαA-HNP2酵母表达载体,转化E.coliJM109,扩增重组子,经限制*核*内切酶BlnI线*化,转毕赤酵...

• Megalin基因片段（3189-4169）的克隆及其表达

  【关键词】肾炎【摘要】目的大鼠Heymann肾炎（HN）是人类膜*肾病的经典动物模型，其发病机制的研究推动了人们对膜*肾病的理解。Megalin是HN主要致病抗原，也是低密度脂蛋白受体家族成员，其胞外结构形成的4簇配体结合区域均可能存在抗原...

• 斑茅SAMDC基因的克隆及其原核表达分析

  以斑茅(Erianthusarundinaceus)samdc基因的cDNA为基础,采用基因重组技术,将该基因按正确的阅读框架定向克隆于原核表达载体pET-29a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达,并对表达产物进行...

• 人脂联素受体1和2的真核表达

  目的扩增和表达人脂联素受体1(AdipoR1)和人脂联素受体2(AdipoR2)基因.方法利用RT-PCR方法扩增AdipoR1和AdipoR2全长cDNA,将AdipoR1和AdipoR2的cDNA构建到真核表达载体pcDNA3.1,重组...

• 人骨保护素编码区基因的克隆及其真核表达载体的构建

  目的克隆人骨保护素(OPG)编码区基因并构建其真核表达载体.方法以人骨肉瘤细胞系MG63总RNA为模板,采用RT-PCR方法获取OPG编码区基因核苷*序列,应用定向克隆技术,构建真核表达载体pcDNA3.1-OPG-IRES-EGFP.结果...