几种海洋微藻的碱***酶*质初步研究

对5种海洋微藻产生的碱***酶的*质进行了初步研究并确定了碱***酶的测定条件.结果表明,在pH8.2的环境中,各藻产生的碱***酶最佳反应温度在40～50℃内,且存在一定差异;40℃下酶促反应恒速时间及米氏常数也有所不同,酶活恒速时间顺序为东海原甲藻(Prorocentrumdonghaiense)＜强壮前沟藻(Amphidiniumcarterae)＜旋链角毛藻(Chaetoceroscurvisetus)＜中肋骨条藻(Skeletonemacostatum)＜塔玛亚历山大藻(Alexandriumtamarense);米氏常数大小顺序为塔玛亚历山大藻＜东海原甲藻＜中肋骨条藻＜强壮前沟藻＜旋链角毛藻.碱***酶测定条件为:温度40℃,反应时间90min,底物浓度260μmol/L.

李雁宾,LIYan-bin(*海洋大学,海洋污染生态化学实验室,山东,青岛,266003;*海洋大学,海洋化学理论与工程技术教育部重点实验室,山东,青岛,266003*海洋大学,环境科学与工程学院,山东,青岛,266003) 

第2篇：几种海洋微藻**还原酶特*的初步研究

确定了离体法提取时间,并采用离体法对5种海洋微藻**还原酶的特*进行了初步研究.结果表明,离体法的最佳提取时间为5min;在pH7.9及20℃条件下,各藻**还原酶的酶促反应恒速时间及以KNO3为底物的米氏常数存在差异,但以NADH为底物的米氏常数基本相同.酶促反应恒速时间顺序为锥状斯氏藻＜尖刺拟菱形藻＜东海原甲藻＜中肋骨条藻＜旋链角毛藻,以KNO3为底物的米氏常数大小顺序为旋链角毛藻＜东海原甲藻～中肋骨条藻＜锥状斯氏藻～尖刺拟菱形藻.此外,FAD对各藻**还原酶活*的影响存在种属差异.

第3篇：一个耐热碱***酯酶突变型的研究

为了进一步揭示蛋白质的耐热机制,对含有耐热碱***酯酶(FD-TAP)的表达质粒pTAP503F进行了随机诱变,用菌落原位显*法从约5000个转化子中筛选到4个耐热*下降的突变型克隆,并对其中1个克隆(TAPM3)进行了部分酶学*质、DNA和氨基*序列的研究.酶学*质研究表明,与野生型相比,该突变型酶的耐热*有较大幅度的下降,而热激活*无明显改变.DNA序列分析表明在1239位TAPM3发生GA转换,导致427位的甘氨*变为丝氨*(G427S),这种突变对酶的耐热*、米氏常数、活化能影响较为明显.这说明只须1个氨基*置换就会对蛋白质耐热*变化起巨大作用,并且氨基*残基侧链的大小、电荷等能使蛋白质结构松散的*质,会导致蛋白质耐热*下降.

第4篇：褐藻*降解酶特*的初步研究

对从海带(Laminariajaponica)病烂处分离出的2株别单胞菌属的褐藻*降解菌(简称菌株A1,A2)进行了褐藻**降解能力及胞外产物中褐藻*酶特*的初步分析.结果表明,2株褐藻*降解菌中,菌株A2表现出较强的对褐藻**的降解能力;同时菌株A2所分泌的褐藻*酶在pH6.0～8.0相对稳定,30℃以下酶不易失活.在较低离子浓度时,Mn2+,Ba2+对反应有较强的促进作用,Ag+和Pb2+则有明显的抑制作用.

第5篇：两种海洋微藻**还原酶活*测定方法的比较研究

对6种常见海洋微藻的**还原酶活*测定方法进行了初步研究.确立了离体法和活体法的提取(振荡)时间及酶促反应时间,分别为:min,30min(离体法)和6min,10min(活体法),并对2种方法进行了对比.结果表明:在本文条件下,离体法较活体法更适于进行塔玛亚历山大藻(Alexandriumtamarense)、强壮前沟藻(Amphidiniumcarterae)、中肋骨条藻(Skeletonemacostatum)、新月菱形藻(Nitzchiaclosterium)和旋链角毛藻(Chaetoceroscurvisetus)的**还原酶活*的测定;活体法更适于东海原甲藻(Prorocentrumdonghainase)**还原酶活*的测定.

李雁宾,LIYan-Bin(*海洋大学,海洋化学理论与工程技术教育部重点实验室,山东,青岛,266100;*海洋大学,化学化工学院,山东,青岛,266100;*海洋大学,环境科学与工程学院,山东,青岛,266100) 

第6篇：联苯*对碱***酶抑制作用及其动力学研究

联苯*作为一种危害严重对环境污染物,对小牛肠碱***酶的酶活力有明显的抑制作用.这种抑制随着联苯*浓度的增加而增强,当联苯*浓度>1.0μg/L时,其抑制程度趋于恒定.运用酶活力研究的动力学模型,在不同的酶底物浓度及不同的抑制剂浓度下,用分光光度法监测酶底物水解产物浓度随时间变化的过程,研究了抑制剂联苯*对小牛肠碱***酶活*的抑制动力学,结果表明,联苯*对小牛肠碱***酶的抑制是可逆抑制,属于可逆抑制中的竞争*抑制类型;求得其抑制剂常数Ki为1.28×10-7mol/L.

宋立荣,SONGLi-Rong(中科院水生生物研究所,武汉,430072)